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DEPC处理水(0.1%)

DEPC 处理水(0.1%)DEPC 处理水(0.1%)是用 0.1% 的焦碳酸二乙酯(DEPC)处理过并经高温高压灭菌的超纯水,不含 RNase、DNase 和 proteinase。以下是详细介绍:制备方法:通常将 1ml DEPC 溶于 1L 纯净水中,使其终浓度为 0.1%,猛烈振摇后,于室温静止数小时或过夜,再经高压灭菌处理,DEPC 会分解为二氧化碳和乙醇,从而得到 DEPC 处理水。性质特点:为无色液体,折射率为 1.398(20°C),密度约 1.12g/ml。DEPC 处理水应储存在干净、无 RNA 酶的容器中,可室温保存,也可在 2-8°C 保存,注意避光干燥密闭。作用原理:DEPC 能与 RNA 酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应,从而使 RNA 酶失活,有效防止 RNA 被降解,保证 RNA 样品的完整性和实验结果的可靠性。主要用途:常用于 RNA 沉淀的溶解,以及含有 RNA 的各种反应体系,如反转录、siRNA 的退火等,还可用于清洗和浸泡移液枪头、离心管等实验器材,也可在 RNA 提取过程中用于溶解 RNA 样品和洗涤 RNA。注意事项:DEPC 气味芳香浓烈,具有强挥发性和毒性,是潜在的致癌物质,操作时应在通风橱中进行,并佩戴乳胶手套和口罩,避免接触皮肤。此外,含有 Tris 缓冲液的溶液中不能加入 DEPC,因为 DEPC 会与 Tris 中的伯胺基反应,无法实现对 RNA 酶的灭活处理。

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