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单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色)单组分 TMB 显色液(ELISA,HRP 显色)是酶联免疫吸附试验(ELISA)中常用的显色试剂,专门用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或抗原的显色反应,其核心成分是 3,3',5,5'- 四甲基联苯胺(TMB),因无需额外混合其他组分即可直接使用而得名,在科研和临床检测中应用广泛。核心特性与成分核心成分:主要包含 TMB 底物、过氧化物(如过氧化氢)以及缓冲液等,所有组分预先混合为单一溶液,无需实验者临用前调配。显色原理:在 HRP 的催化作用下,TMB 被过氧化物氧化,发生颜色变化 —— 从无色(或淡黄色)逐渐变为蓝色,若加入终止液(如稀硫酸),则会转变为黄色,通过酶标仪在特定波长(通常 450nm,终止后检测)下测定吸光度,可反映样本中抗原或抗体的含量。优势:操作简便:省去多组分混合步骤,减少实验误差,尤其适合高通量检测。稳定性较好:预先优化的配方能保证组分间的协同作用,降低因混合比例不当导致的显色差异。灵敏度高:可检测低浓度的 HRP 标记物,满足 ELISA 对微量物质的检测需求。适用场景与操作要点适用场景:广泛用于病原体检测(如病毒、细菌抗体)、蛋白质定量、激素检测、自身抗体筛查等 ELISA 实验,是 HRP 标记体系的配套显色试剂。操作要点:显色时需避光:TMB 对光敏感,避免强光直射,否则可能导致背景升高或显色不均。控制显色时间:根据实验需求和样本信号强度,在规定时间内终止反应(通常 37℃孵育 10-30 分钟),超时可能导致信号饱和或非特异性显色。终止液匹配:通常使用稀硫酸(如 2M H₂SO₄)作为终止液,终止后颜色稳定(黄色),需在 1 小时内完成吸光度测定。储存与注意事项储存条件:通常需 2-8℃避光保存,避免冷冻,保质期一般为 6-12 个月(具体参考yy易游体育 说明书)。安全性:TMB 具有一定刺激性,操作时需佩戴手套,避免接触皮肤和黏膜;终止液为酸性,需注意防护。单组分 TMB 显色液凭借便捷性和稳定性,成为 ELISA 实验中 HRP 显色的主流选择,其性能直接影响实验的灵敏度和重复性,因此需选择质量可靠的yy易游体育 ,并严格遵循操作规范。

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