实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被CC趋化因子受体1(CCR1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的CC趋化因子受体1(CCR1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中CC趋化因子受体1(CCR1)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 猴CC趋化因子受体1(CCR1)酶联免疫试剂盒
实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被极低密度脂蛋白受体(VLDLR)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的极低密度脂蛋白受体(VLDLR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中极低密度脂蛋白受体(VLDLR)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 猴极低密度脂蛋白受体(VLDLR)酶联免疫试剂盒
实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肌酸激酶同工酶MB(CKMB)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌酸激酶同工酶MB(CKMB)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中肌酸激酶同工酶MB(CKMB)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫试剂盒
实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被黑色素瘤关联ME20 (ME20M)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的黑色素瘤关联ME20 (ME20M)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中黑色素瘤关联ME20 (ME20M)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 猴黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联免疫试剂盒
实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶联免疫试剂盒
猴内吗啡肽2(EM2)酶联免疫试剂盒 实验原理 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。 实验所需自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱 试剂盒组成名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP6mL3mL无20×洗涤缓冲液20mL20mL按说明书进行稀释底物 A6mL3mL无底物 B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2 张2 张无说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个无 操作步骤1. 准备工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时准备好实验所需的材料和器具。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入标准品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。 结果分析根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。注意事项1. 在操作过程中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤过程中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验过程中,需保持操作环境的清洁和整洁,避免交叉污染。
猴蛋白C抑制剂(PCI)酶联免疫试剂盒实验原理 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。 实验所需自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱 试剂盒组成名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP6mL3mL无20×洗涤缓冲液20mL20mL按说明书进行稀释底物 A6mL3mL无底物 B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2 张2 张无说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个无 操作步骤1. 准备工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时准备好实验所需的材料和器具。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入标准品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。 结果分析根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。注意事项1. 在操作过程中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤过程中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验过程中,需保持操作环境的清洁和整洁,避免交叉污染。
猴磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)酶联免疫试剂盒实验原理 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。 实验所需自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱 试剂盒组成名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP6mL3mL无20×洗涤缓冲液20mL20mL按说明书进行稀释底物 A6mL3mL无底物 B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2 张2 张无说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个无 操作步骤1. 准备工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时准备好实验所需的材料和器具。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入标准品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。 结果分析根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。注意事项1. 在操作过程中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤过程中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验过程中,需保持操作环境的清洁和整洁,避免交叉污染。
猴白细胞弹性蛋白酶(HLE)酶联免疫试剂盒 实验原理 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。 实验所需自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱 试剂盒组成名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP6mL3mL无20×洗涤缓冲液20mL20mL按说明书进行稀释底物 A6mL3mL无底物 B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2 张2 张无说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个无 操作步骤1. 准备工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时准备好实验所需的材料和器具。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入标准品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。 结果分析根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。注意事项1. 在操作过程中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤过程中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验过程中,需保持操作环境的清洁和整洁,避免交叉污染。
猴激肽释放酶6(KLK6)酶联免疫试剂盒 实验原理 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。 实验所需自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱 试剂盒组成名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP6mL3mL无20×洗涤缓冲液20mL20mL按说明书进行稀释底物 A6mL3mL无底物 B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2 张2 张无说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个无 操作步骤1. 准备工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时准备好实验所需的材料和器具。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入标准品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内液体。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。 结果分析根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。注意事项1. 在操作过程中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤过程中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验过程中,需保持操作环境的清洁和整洁,避免交叉污染。