植物(Plant)烟草花叶病毒(TMV)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被烟草花叶病毒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中烟草花叶病毒(TMV)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。3. 植物取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
植物(Plant)Y病毒(PVY)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被Y病毒抗体包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中Y病毒(PVY)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
植物(Plant)卷叶病毒(PLRV)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被卷叶病毒(PLRV)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中卷叶病毒(PLRV)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
植物(Plant)马铃薯病毒(PV)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物马铃薯病毒(PV)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中植物马铃薯病毒(PV)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
马铃薯(Potato)M病毒(PVM)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被马铃薯M病毒抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中马铃薯M病毒(PVM)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
马铃薯(Potatoe)A 病毒(PVA)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被马铃薯A 病毒(PVA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中马铃薯A 病毒(PVA)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
马铃薯(Potatoe)S病毒(PVS)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被马铃薯S病毒(PVS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中马铃薯S病毒(PVS)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
马铃薯(Potatoe)X病毒(PVX)ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被马铃薯X病毒(PVX)抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中马铃薯X病毒(PVX)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。3. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*佳检测效果。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL 0.5mL 无阳性对照0.5mL 0.5mL 无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00; 阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.153. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
植物组织蔗糖含量检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。 货号:YX-W-B502 规格:100T/96S yy易游体育 内容: 提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:粉剂 10mg×1 支,4℃保存,临用前加入 1mL 蒸馏水溶解,用水稀释 10 倍,备用,即 1mg/mL; 试剂二:液体 2mL×1 瓶,4℃保存; 试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存; 试剂四:液体 5mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:粉剂 0.5g×1 瓶,常温保存。 植物组织蔗糖含量检测试剂盒说明书 yy易游体育 介绍: 蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对 于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等yy易游体育 质量控 制的重要指标之一。 先用碱与样品共热,破坏其中的还原糖。酸性条件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一 步与间苯二酚反应,生成有色物质,在 480nm 下有特征吸收峰。 所需的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板和蒸馏水。 操作步骤 一、样品制备: 称取0.1g 样本,常温研碎,加入0.5mL 提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中 10min,振荡3~5 次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清,加入2mg试剂五,80℃脱色30min, 再加入0.5mL 提取液,4000g,25℃离心10min,取上清液测定。 二、测定步骤: 1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。 2、样本测定,(在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂): 试剂(µL)空白管标准管测定管样本25 试剂一25 蒸馏水25 试剂二151515混匀,100℃煮沸 5min 左右(盖紧,防止水分散失)试剂三175175175试剂四505050混匀,沸水浴反应 10min 左右,冷却后取 200µL 至微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 480nm 处光吸 收值,空白管、标准管和测定管分别记为 A1、A2 和 A3 三、蔗糖含量计算: 1、按照蛋白质含量计算 蔗糖含量(mg/mg prot)= (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr 此法需要自行测定蛋白浓度。 2、按照样品质量计算 蔗糖含量(mg/g 鲜重)=(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W C 标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.025mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。 本yy易游体育 仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物多糖(Pol)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物多糖(Pol)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。保存条件及有效期1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中植物多糖(Pol)的含量;2.试剂盒保存:2-8℃;3.有效期:6个月。植物(Plant)多糖(Pol)ELISA检测试剂盒标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 植物多糖(Pol)ELISA试剂盒 标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 植物多糖(Pol)ELISA试剂盒操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。植物多糖(Pol)ELISA试剂盒注意事项1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 植物多糖(Pol)ELISA试剂盒洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7.底物请避光保存。 8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 植物多糖(Pol)ELISA试剂盒试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%