标准山羊血清（细菌培养专用）yy易游体育 描述山羊血清采集自正常健康的山羊供体，经脂质萃取和透析后储存于缓冲液（0.01 M磷酸钠，0.25 M氯化钠, pH 7.6）中。常用于各种免疫实验，起到封闭或对照的作用。本品用于封闭的常见使用浓度为5%（v/v）。yy易游体育 使用1）山羊血清是以冻干粉形式提供的，本品需要先溶解配制成100%原液后再稀释使用。溶解方法：用10ml 蒸馏水（dH2O）充分溶解冻干粉（如果不澄清，可对其离心处理），此时得到的即是100%原液。然后按照1:20的比例用缓冲液，如PBS或PBST，稀释到需要的5%工作液。也可以根据自身实验条件，稀释到合适的工作液浓度。2）山羊血清以100%原液的形式提供，直接用合适的缓冲液稀释到需要的工作液。yy易游体育 性质蛋白浓度（Protein concentration）60 mg/mL缓冲液（Buffer）0.01 M磷酸钠，0.25 M氯化钠, pH 7.6防腐剂（Preservative）0.05%叠氮化钠运输与保存方法冰袋运输。冻干粉保存于2～8℃。100%原液保存于2～8℃，6个星期稳定。建议原液分装后置于≤-20℃，以延长保存期。重溶后100%原液的有效期1年。注意事项1）本品含叠氮化钠，对人体有害，请注意适当防护。2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3）注意无菌操作4）注意避免反复冻融。反复冻融可能产生沉淀，可以通过无菌条件下，3500rpm离心10min除去沉淀标准山羊血清（细菌培养专用）常见问题 保存方法血清应保存在-5℃至-20℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。解冻方法将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。避免产生沉淀物1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法（-2℃至4℃至室温），若血清解冻时改变的温度太大（如-20℃至37℃），实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。 5、若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。若血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。热灭活一般是以56℃，30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。鉴别方法 血清血液凝固析出的淡黄色透明液体 。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆＊大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。血浆血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。
标准马血清（细菌培养专用）yy易游体育 介绍 采用健康动物血液为原料，经无菌采集，分离，微孔过滤后而成，性状为橙清液体，无噬菌体，无溶血，无异物，无细菌，真菌支原体毒形体衣原体等，适应于试验室或生化科研相关试验，满足不同科研实验的多种需求注意事项1、注意避免反复冻融。反复冻融可能产生沉淀，可以通过无菌条件下，3500 rp m离心10 min除去沉淀。2、注意无菌操作。标签：马血清说明书 ；马血清规格yy易游体育 用途1、可用于细胞培养或诱导树突细胞，且细胞生长，增殖状况良好 有研究人员分别用胎牛血清和马血清培养马单核细胞来产生权突状细胞（eqMoDC），结果发现，马血清生成的eqMoDC与FBS生成的eqMoDC没有区别。然而，与马血清补充培养基一起孵育的e qMo DC在从单核细胞分化过程中表现出更具特征性的树突状细胞形态。在用马血清培养的eqMoDC中也观察到细胞活力的显著增加。此外，发现在马血清存在下产生的eqMoDC在功能性T淋巴细胞启动能力方面优越，并且引发的非特异性增殖显著减少。2、可用于原代培养神经细胞 有人用含10%马血清的DMEM，分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞。发现和添加2%神经细胞生长剂B27的Neurobasal培养基相比，含10%马血清的DMEM培养基更节省成本，方便廉价。3、特定脂肪酸产物浓度的马血清,对造血细胞有支持作用 研究表明，磷脂酶A2特定脂肪酸产物的浓度马血清，支持多能小鼠造血祖细胞FDCP-Mix细胞自我更新的能力。4、可增强猪单性生殖胚胎植入前，胚层的发育。 有研究通过对比不同血清和血清样物质，对猪单性生殖胚胎植入前发育的影响，寻找适合其发育的培养基。对单性生殖胚胎进行猪滤泡液（PFF)、胎牛血清(（FBS)、马血清（HS）或猪血清白蛋白（PSA)处理，培养2天后。通过囊胚形成和孵化，发现马血清是增强胚层发育的＊有效蛋白质来源。接下来，使用三种不同浓度的HS (10%，20%和30%）来确定改善猪单性生殖胚胎发育所需的适宜HS浓度。所有HS浓度均增加了囊胚细胞数量，降低了囊胚凋亡细胞的发生率，其中20%效果更显著。5、马血清添加到微生物培养基中，可用于培养微生物，如∶(1）马血清添加到培养基中用于支原体的培养。在《兽药典》中，含马血清的支原体培养基被用于兽用疫苗的支原体检查。用KM2培养基(含马血清)还可培养猪肺炎支原体。(2）马血清加入到固体和液体培养基中，可用于培养幽门螺杆菌。并且，和羊血清和牛血清比较，添加马血清的培养基更易于分装和保存。标准马血清（细菌培养专用）检验报告：检测项目检测结果外观淡黄色液体PH7.26无菌检验阴性总蛋白68.6g/L白蛋白35.1g/L支原体阴性内毒素8UE/mL血红蛋白0.04g/L血清的主要作用●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。鉴别方法 血清血液凝固析出的淡黄色透明液体 。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆＊大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。血浆血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。
标准小牛血清（细菌培养专用） 血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、激素、脂质和矿物质来源。此外，血清还可调节细胞膜通透性，并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。 yy易游体育 简介 牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）4、无菌检验 阴性5、支原体检验 阴性6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）7、牛腹泻病毒 阴性8、大肠杆菌噬菌体 阴性9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线（接种浓度）＊大增殖浓度≥2.5×106 个/ml细胞倍增时间 ≤15h克隆率 ≥85%细菌培养 细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，它可以造福人类，也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养，即将其接种于培养基上，使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。细菌培养的条件 培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件(温度、pH值、时间，对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。细菌培养的步骤 以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒，培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。(三)接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%~50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占＊＊优势，影响培养的＊终产量和质量。(四)培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。标准小牛血清（细菌培养专用）yy易游体育 功能 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。适用细胞多种肿瘤原代和293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela细胞系，各种肿瘤细胞等保存条件1. -20℃，五年2. 4ºC保存通常不宜超过1个月血清的主要成分 血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。注意事项1. 融化方法：建议将血清从-20℃冰箱取出后，于2-8℃解冻过夜，并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。2. 不宜 4℃甚至更高温度长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须预留一定体积，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。3. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀，属正常现象，主要是解冻后血清中纤维蛋白及脂蛋白变性造成的，不影响使用。可以通过3500rpm离心5分钟去除，但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。 4. 本yy易游体育 未经灭活处理，使用时请视实验情况进行处理，灭活条件为56℃，30min。除非必须，一般不建议对血清进行热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。 牛血清是通过无菌手术剖腹后取胎，穿刺心脏采血制成。牛血清中所含的对培养细胞有害的成分（抗体等）更少，故质量更高。本yy易游体育 以健康胎牛血液为原料加工而成，不添加任何外源因子，不含激素等。经0.65μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤，3次0.1μm微孔滤膜精过滤后，获得成品胎牛血清。本yy易游体育 无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染，内毒素水平极低。
标准大牛血清（细菌培养专用） 血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、激素、脂质和矿物质来源。此外，血清还可调节细胞膜通透性，并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。 yy易游体育 简介 牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）4、无菌检验 阴性5、支原体检验 阴性6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）7、牛腹泻病毒 阴性8、大肠杆菌噬菌体 阴性9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线（接种浓度）＊大增殖浓度≥2.5×106 个/ml细胞倍增时间 ≤15h克隆率 ≥85%细菌培养 细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，它可以造福人类，也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养，即将其接种于培养基上，使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。细菌培养的条件 培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件(温度、pH值、时间，对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。细菌培养的步骤 以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒，培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。(三)接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%~50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占＊＊优势，影响培养的＊终产量和质量。(四)培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。标准大牛血清（细菌培养专用）yy易游体育 功能 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。适用细胞多种肿瘤原代和293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela细胞系，各种肿瘤细胞等保存条件1. -20℃，五年2. 4ºC保存通常不宜超过1个月血清的主要成分 血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。注意事项1. 融化方法：建议将血清从-20℃冰箱取出后，于2-8℃解冻过夜，并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。2. 不宜 4℃甚至更高温度长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须预留一定体积，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。3. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀，属正常现象，主要是解冻后血清中纤维蛋白及脂蛋白变性造成的，不影响使用。可以通过3500rpm离心5分钟去除，但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。 4. 本yy易游体育 未经灭活处理，使用时请视实验情况进行处理，灭活条件为56℃，30min。除非必须，一般不建议对血清进行热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。 牛血清是通过无菌手术剖腹后取胎，穿刺心脏采血制成。牛血清中所含的对培养细胞有害的成分（抗体等）更少，故质量更高。本yy易游体育 以健康胎牛血液为原料加工而成，不添加任何外源因子，不含激素等。经0.65μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤，3次0.1μm微孔滤膜精过滤后，获得成品胎牛血清。本yy易游体育 无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染，内毒素水平极低。
标准新生牛血清（细菌培养专用） 血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、激素、脂质和矿物质来源。此外，血清还可调节细胞膜通透性，并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。 yy易游体育 简介 胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。 显然，胎牛血清是品质＊高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分＊少。1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）4、无菌检验 阴性5、支原体检验 阴性6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）7、牛腹泻病毒 阴性8、大肠杆菌噬菌体 阴性9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线（接种浓度）＊大增殖浓度≥2.5×106 个/ml细胞倍增时间 ≤15h克隆率 ≥85%细菌培养 细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，它可以造福人类，也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养，即将其接种于培养基上，使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。细菌培养的条件 培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件(温度、pH值、时间，对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。细菌培养的步骤 以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒，培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。(三)接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%~50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占＊＊优势，影响培养的＊终产量和质量。(四)培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。yy易游体育 功能 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。适用细胞多种肿瘤原代和293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela细胞系，各种肿瘤细胞等保存条件1. -20℃，五年2. 4ºC保存通常不宜超过1个月血清的主要成分 血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。 牛血清是细胞培养中用量＊大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。注意事项1. 融化方法：建议将血清从-20℃冰箱取出后，于2-8℃解冻过夜，并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。2. 不宜 4℃甚至更高温度长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须预留一定体积，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。3. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀，属正常现象，主要是解冻后血清中纤维蛋白及脂蛋白变性造成的，不影响使用。可以通过3500rpm离心5分钟去除，但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。 4. 本yy易游体育 未经灭活处理，使用时请视实验情况进行处理，灭活条件为56℃，30min。除非必须，一般不建议对血清进行热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。 胎牛血清是通过无菌手术剖腹后取胎，穿刺心脏采血制成。胎牛血清中所含的对培养细胞有害的成分（抗体等）更少，故质量更高。本yy易游体育 以健康胎牛血液为原料加工而成，不添加任何外源因子，不含激素等。经0.65μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤，3次0.1μm微孔滤膜精过滤后，获得成品胎牛血清。本yy易游体育 无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染，内毒素水平极低。
抗凝裂解驴血（无菌）规格及单位:100ml/200ml/500ml保存:-20℃,保质期见瓶身标签主要成分: 血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。 血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对生长或活性是达到生理平衡的。抗凝裂解驴血的主要作用：1、提供激素和各种生长因子。2、对培养中的细胞起到某些保护作用。3、提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素,脂肪,以及激素等,转铁蛋白携带铁;结合蛋白在过程中起重要作用。4、特别适用于免疫学研究,全球科研人员信赖的yy易游体育 ;提供基本营养物质,激素,各种生长因子,促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤,结合蛋白对培养中的细胞起到某些保护作用。5、提供基本营养物质:氨基酸,维生素,无机物,脂类物质,核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可 使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻: 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。注意须知（仅供参考）：1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。3.热灭活本yy易游体育 除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。5.yy易游体育 有效期，检定合格之日起有效期5年。 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。抗凝裂解驴血（无菌）血清的主要成分 血清使血浆出去纤维蛋白原而形成的一种和复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素以及无机物等,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用,且血清成分及其含量常随动物的性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而异。它主要由水和各种化学成分组成,包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶等。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.公司yy易游体育 仅用于科研对于血清的成分的研究,仍然存在一些未解之谜:1.血清的成分复杂,可能有几百种之多,对其准确的成分、含量及作用尚且不清,尤其是一些多肽生长类因子、激素和脂类等。2.血清都是批量 ,各批量之间差异很大,且保存期一般不超过一年,因此要保证每批血清的相似性几乎不太现实;3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中”的原因之一。 质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1. 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。2． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。3． 对细胞有良好的支持繁殖作用。
抗凝裂解驴血规格及单位:100ml/200ml/500ml保存:-20℃,保质期见瓶身标签主要成分: 血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。 血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对生长或活性是达到生理平衡的。抗凝裂解驴血的主要作用：1、提供激素和各种生长因子。2、对培养中的细胞起到某些保护作用。3、提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素,脂肪,以及激素等,转铁蛋白携带铁;结合蛋白在过程中起重要作用。4、特别适用于免疫学研究,全球科研人员信赖的yy易游体育 ;提供基本营养物质,激素,各种生长因子,促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤,结合蛋白对培养中的细胞起到某些保护作用。5、提供基本营养物质:氨基酸,维生素,无机物,脂类物质,核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可 使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻: 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。注意须知（仅供参考）：1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。3.热灭活本yy易游体育 除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。5.yy易游体育 有效期，检定合格之日起有效期5年。 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。抗凝裂解驴血血清的主要成分 血清使血浆出去纤维蛋白原而形成的一种和复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素以及无机物等,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用,且血清成分及其含量常随动物的性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而异。它主要由水和各种化学成分组成,包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶等。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.公司yy易游体育 仅用于科研对于血清的成分的研究,仍然存在一些未解之谜:1.血清的成分复杂,可能有几百种之多,对其准确的成分、含量及作用尚且不清,尤其是一些多肽生长类因子、激素和脂类等。2.血清都是批量 ,各批量之间差异很大,且保存期一般不超过一年,因此要保证每批血清的相似性几乎不太现实;3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中”的原因之一。 质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1. 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。2． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。3． 对细胞有良好的支持繁殖作用。
抗凝裂解马血用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可 使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。抗凝马血(无菌 袋装) ;的解冻: 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。注意须知（仅供参考）：1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。3.热灭活本yy易游体育 除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。5.yy易游体育 有效期，检定合格之日起有效期5年。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。 抗凝马血的主要作用：●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（*******、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。 因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3,硒等。抗凝裂解马血血清的主要成分 血清使血浆出去纤维蛋白原而形成的一种和复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素以及无机物等,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用,且血清成分及其含量常随动物的性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而异。它主要由水和各种化学成分组成,包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶等。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.公司yy易游体育 仅用于科研对于血清的成分的研究,仍然存在一些未解之谜:1.血清的成分复杂,可能有几百种之多,对其准确的成分、含量及作用尚且不清,尤其是一些多肽生长类因子、激素和脂类等。2.血清都是批量 ,各批量之间差异很大,且保存期一般不超过一年,因此要保证每批血清的相似性几乎不太现实;3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中”的原因之一。 质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用。
抗凝裂解马血（无菌）用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可 使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。抗凝马血(无菌 袋装) 的解冻: 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。注意须知（仅供参考）：1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。3.热灭活本yy易游体育 除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。5.yy易游体育 有效期，检定合格之日起有效期5年。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。 抗凝马血的主要作用：●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（*******、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。 因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3,硒等。抗凝裂解马血（无菌）血清的主要成分 血清使血浆出去纤维蛋白原而形成的一种和复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素以及无机物等,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用,且血清成分及其含量常随动物的性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而异。它主要由水和各种化学成分组成,包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶等。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.公司yy易游体育 仅用于科研对于血清的成分的研究,仍然存在一些未解之谜:1.血清的成分复杂,可能有几百种之多,对其准确的成分、含量及作用尚且不清,尤其是一些多肽生长类因子、激素和脂类等。2.血清都是批量 ,各批量之间差异很大,且保存期一般不超过一年,因此要保证每批血清的相似性几乎不太现实;3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中”的原因之一。 质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用。
抗凝裂解小牛血 用法 血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。注意事项 有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。解冻 将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。鉴别方法： 血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。 这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。血清保存应该注意以下几点：(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.抗凝裂解小牛血 注意事项: 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。 需自备PBS。 本yy易游体育 仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作步骤(仅供参考):1、贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。质量标准血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。6． 对细胞有良好的支持繁殖作用
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