人α-乳白蛋白ELISA试剂盒 概述:ELISA（酶联免疫吸附检测）是一种平板检测技术，旨在检测和定量肽、蛋白质、抗体和激素等物质。其他名称，比如酶 免疫测定（EIA）也用于描述该的技术。在 ELISA 中，抗原必须固定化到固体表面，然后与连接到酶的抗体混合。通过 与适当的底物孵育，测量报告基因酶的活性来产生可测量的产物，从而实现检测。该检测策略中的＊关键元素是高度特 异性的抗体-抗原相互作用。 ELISA试剂盒的特点有：一、高效、灵敏、特异的抗体二、节省实验经费三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型五、稳定的重复性和可靠性 ELISA 试剂盒主要保证规格概述规格 描述这些对您的好处是？标准品校准校准符合国家生物标准和控制研究所 (NIBSC) 标准 (如可用)可在多个平台上实现准确定量和一致的参考标准精度板间 CV <10%<10% 的平均板内 CV获得一致的结果稀释线性度检测范围内的线性结果可准确定量连续稀释样品平行性重组蛋白标准品模拟天然蛋白可靠地检测样品回收率缓冲液经过优化，可＊大限度减少基质效应有助于确保对血清和血浆等复杂基质内的样品进行准确定量分析灵敏度针对特定检测类型检测相关水平的蛋白实现低水平蛋白检测特异性使用类似分析物进行交叉反应性测试帮助确保准确测量目标蛋白质批次间一致性对内部控制进行测试，以评估数据是否在设定范围内有助于确保新批次获得一致的结果 检测内精度检测内验证显示检测板内孔间的重现性。检测内验证产生的数据有助于确保在板的不同孔中检测的样品给出可比较结果。以下是为具有代表性的板内验证实验生成和报告的数据示例。在本示例中， 通过在同一检测中检测三个样品各重复 14 次来评估 Invitrogen VCAM-1 人 ELISA 试剂盒。每个样品的 %CV 表明该检测具有良好的重现性。具有已知 Hu sVCAM-1 浓度的样品重复检测14 次，以确定检测的精度。参数样品 1样品 2样品 3平均值（ng/mL）1.234.3318.59标准差0.060.331.43变异系数 (%CV)4.857.627.68检测间精度检测间精度显示不同日期进行的检测间重现性。检测间精度通常为< 10%。这确保获得的结果随着时间的推移和试剂盒之间保持一致。以下是为检测间精度生成和报告的典型数据示例。在该示例中， 使用 Invitrogen 淀粉样蛋白 β 42 人 ELISA 试剂盒在多天内检测三份样品，共检测 36 次。结果显示变异系数小于 10%，从而证明了检测间良好再现性。参数样品 1样品 2样品 3平均值（ng/mL）71.3040.1621.29标准差5.243.961.13Coefficient of Variation (% CV)7.369.855.32稀释线性度线性是相对于基于标准曲线的分析物计算量来定义。样品中分析物的＊终计算浓度应与检测定量范围内的任何稀释浓度相同。开发完善的免疫检测试剂盒可＊大限度地减少不同样品基质和其他可能干扰的因素的潜在影响。稀释线性验证实验提供了关于在不同稀释水平下测试的样品结果精度的信息。对每种经验证样品类型进行稀释线性测试，如果结果是每种稀释预期浓度的 70%-130%，则视为良好。线性对于在测定的动态范围内准确测量分析物浓度非常重要，可使用公式计算：% 线性度 = (稀释后测量浓度 / 预期浓度) x 100特定样品类型的稀释线性度通常如下表所示。在该示例中， 使用 HeLa 细胞裂解物评价 Invitrogen c-Myc (总) 人 ELISA 试剂盒。在检测的动态范围内，用试剂盒随附的标准稀释缓冲液稀释 HeLa 细胞裂解物。测量值与预期值显示出良好的检测线性，并且没有来自样品基质的明显干扰。HeLa 细胞在 37°C 下，含有 10% 胎牛血清 (FBS) 的 DMEM 中生长，并用 细胞提取缓冲液裂解，并进行超声处理。将该裂解物在标准稀释缓冲液中稀释至检测范围，并测量 c-Myc（总量）。检测结果与预期浓度的线性回归检测产生的相关系数为0.99。细胞裂解物稀释测量值（pg/mL）预期值（pg/mL）% 线性1/10372.3372.31001/20205.7186.141111/40117.293.11261/8056.046.541201/16025.823.31111/3208.811.676ELISA 平行性平行性提供了在给定 ELISA 中以相同方式检测天然和重组样品的确认。平行性验证产生的数据确保给定分析物在天然样品中以类似于标准曲线的剂量依赖性方式被识别。 ELISA 回收率回收率用于确定分析物检测是否受样品基质差异的影响。基质（如血清和血浆）可能具有干扰因素，影响 ELISA 准确定量分析物的能力。通过将已知量的分析物加标到不同样品基质中来验证回收率。进行检测并确定回收率。通常，如果平均回收率为 80%-120%，则认为样品基质对检测准确定量分析物的能力影响＊小。 右表是用于报告回收率的典型格式。在该示例中， 检测了 Invitrogen 脂联素人 ELISA 试剂盒在 5 份不同血浆样品中的回收率。 样品编号平均回收率 (%)199.6299.83100.2492.5591.8 ELISA 灵敏度灵敏度定义为可与背景区分的＊低分析物水平。这通常称为分析灵敏度或检测限。通过将零标准重复获得的平均 O.D. 加上 2 个标准偏差来确定灵敏度。例如， Invitrogen Tau (磷酸化) [pT181] 人 ELISA KI 灵敏度 <为 10 pg/mL。这表明测试的每个试剂盒批次的灵敏度均低于 10pg/mL。用于报告 ELISA 测定灵敏度的典型规格是 " 人 Tau [pT181] <的＊低检测浓度为 10 pg/mL。这通过零标准检测 64 次时获得的平均 O.D. 加上两个标准偏差来确定。ELISA 特异性进行特异性测试以验证检测到的目标分析物与其他密切相关的分子未发生交叉反应。交叉反应可能导致假阳性结果或不准确定量。为了确保仅识别所需的分析物，对一组其他物质进行交叉反应性测试。例如， 通过筛选 20 种不同物质的交叉反应性，对 Invitrogen IL-6 小鼠 ELISA 试剂盒的特异性进行了检测。用于报告 ELISA 特异性结果的典型格式是 " 使用 IL-6 小鼠 ELISA 试剂盒检测了一组 10 ， 000 pg/mL 的物质的缓冲溶液。 1β γ 检测后发现无交叉反应性：小鼠 IL-1 β ， IL-2 ， IL-4 ， IL-10 ， IFN- β ， TNF- α ；大鼠 1β IL-1 β ， IL-2 ， IL-4 ， IL-6 ， IFN- γ ， TNF- α ；人 IL-2 ， IL-4 ， IL-6 ， IL-10 ， IL-12 ， IFN- γ ， TNF- α ；猪 IL-8ELISA 质量控制ELISA 的生产过程涉及高质量生产标准，以确保高质量 ELISA 试剂盒的一致生产。基本因素包括—严格的文档和记录保存，人员培训，质量控制程序，设施和设备维护，关键流程的验证，原材料控制，可追溯性，环境监测，变更控制， 和符合监管标准。 ELISA 移液和洗涤技术技巧移液技巧1. 使用符合制造商建议范围内的正确移液器2. 确认吸头已牢固地插与移液器上3. 确认移液时没有气泡4. 在每个标准品，样品或试剂之间更换吸头5. 每种试剂使用不同的储液槽6. 将样品吸取到孔的侧面，避免飞溅7. 始终进行样品 / 标准品复孔设置洗涤流程1. 通过将吸头轻轻地降低到每个孔底部，完全吸液所有孔中的液体。 备注：小心操作，不要划伤孔内侧。2. 用至少 400 μ L ?L 的洗涤缓冲液填充孔3. 浸泡 15 到 30 秒4. 从孔中吸出洗涤缓冲液5. 按照提示重复方案 (通常 3-4 次)6. 清洗完成后，翻转孔板并在吸水组织上轻敲 (必要时用力) 干燥。确保清除所有残留的液体。7. 或者，也可使用洗瓶或自动洗板机。请务必 遵循上述内容。 实验步骤1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果，每次实验请使用新的标准品溶液。3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。 注意事项剂盒的储存1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。 须知：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在验后1个月内使用完毕。yy易游体育 过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 DUMABIO ELISA检测试剂盒公司与各大高校、医院及权威科研单位保持着良好的合作关系，公司的yy易游体育 质量及服务态度得到了他们的一致认可。yy易游体育生物本着客户至上的原则为客户提供优质yy易游体育 ，公司yy易游体育 有任何质量的问题免费包退换（非人为因素造成的）。公司提供免费代测服务，并且收到样本七个工作日出结果，确保数据的准确性
Size:50ul 100ulConcentration:1mg/mlApplications:WB=1:500-2000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,ICC/IF=1:100-500,IF=1:100-500,ELISA=1:5000-10000Cross Reactive Species:Human,Mouse (predicted: Rat,Rabbit,Pig,Cow,Dog)For research use only. Not intended for diagnostic or therapeutic use.Host:RabbitTarget Protein:SEMA4AIR:Immunogen Range:361-460/761Clonality:PolyclonalIsotype:IgGEntrez Gene:64218Swiss Prot:Q9H3S1Source:KLH conjugated synthetic peptide derived from human SEMA4A:361-460/761 Purification:affinity purified by Protein AStorage:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol. Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.Background:SEMA4A belongs to the semaphorin family of soluble and transmembrane proteins. These proteins play a role in guidance of axonal migration during neuronal development and in
人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA检测试剂盒 ELISA试剂盒技术流程 双抗体夹心法(检测未知抗原)间接法(检测未知抗体)1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,＊后一遍用DDW洗涤。4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 ELISA试剂盒需自备的设备及试剂 1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)2. 单道或多道微量加液器及吸头3. 稀释样品的EP管4. 蒸馏水或去离子水5. 吸水纸6. 盛放洗液的容器 性能:1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2．灵敏度：检测浓度小于10 pg/ml。3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。ELISA试剂盒优点：1、高效、灵敏、特异的抗体；2、重复性和可靠性高；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；5、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；6、价格优惠，质量保证，限度的节省实验经费。 实验步骤1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。 注意事项剂盒的储存及有效期1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。 须知：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。yy易游体育 过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 ELISA试剂盒报1、ELISA标准曲线；2、详细的实验步骤；3、完整的实验报告（试剂耗材，实验方法，实验结果及结果说明）； [样本处理及要求]1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。＊后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响＊后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 [需要而未提供的试剂和器材]1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱4.蒸馏水或去离子水 ELISA检测试剂盒承诺公司长期与各大高校、医院及权威科研单位保持着良好的合作关系，公司的yy易游体育 质量及服务态度得到了他们的一致认可。yy易游体育生物本着客户至上的原则为客户提供优质yy易游体育 ，公司承诺yy易游体育 有任何质量的问题免费包退换（非人为因素造成的）。公司提供免费代测服务，并且承诺收到样本七个工作日出结果，确保数据的准确性
Overview Cat. No： DM-11A04-G Format： LiquidHost： Homo Class： MonoclonalType： Antibody Specificity： Binding to RSV F protein Concentration： Please check the label on the tube. Purity ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification： Protein A Storage buffer： PBS or Tris-Gly Storage conditions： Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles. Warning Not for therapeutic use.
Overview Cat. No:DM-A11A04-M Format Liquid Host Homo Class Monoclonal Type Antibody Specificity Binding to RSV F protein Concentration Please check the label on the tube. Purity ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification / Storage buffer PBS or Tris-Gly Storage conditions Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles. Warning Not for therapeutic use.
OverviewCat. No:DM-11A04-G Format: Liquid Host: HomoClass: MonoclonalType: AntibodySpecificity: Binding to RSV F proteinConcentration: Please check the label on the tube. Purity: ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification Protein A Storage buffer: PBS or Tris-Gly Storage conditions: Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles.Warning Not for therapeutic use.
快速高尔基染色试剂盒(神经元和胶质细胞)yy易游体育 货号: DM1158 yy易游体育 规格: 6 × 125ml/6 ×250mlyy易游体育 简介:Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态＊有效的方法之一。 使用Golgi技术，在药物处 理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变 。然而Golgi染色法的不可 靠性且费时已成为这种方法广泛应用的障碍。快速高尔基染色试剂盒（神经元和胶质细胞） 是根据Ramón-Moliner ，Glaser和Van der Loos所阐述的方法原 理设计的 。该试剂盒不仅极大地改进并简化了Golgi-Cox技术，而且被证实在显示神经元和胶质细胞，尤其是树 突棘的形态细节极为灵敏可靠。 生物生产的快速高尔基染色试剂盒已被广泛用于数种动物脑组织染色。 yy易游体育 组成: yy易游体育 名称6 × 125ml6×250ml溶液A125ml250ml溶液B125ml250ml溶液C125ml×2250ml×2溶液D125ml250ml溶液E125ml250ml注：溶液C启封后请尽快用完。 需要但未包括在试剂盒里的物品1. 双蒸水或Milli-Q水2. 塑料/玻璃管或瓶 、琉璃样品回收器、天然毛画笔、滴瓶、塑料镊子3. 组织学耗材：明胶包被的显微镜载玻片盖玻片、染色罐乙醇二甲苯树胶封片剂光学显微镜 组织制备使用此试剂盒前必须仔细阅读以下说明！！l 所用容器（＊好为塑料材质） 必须用蒸馏水冲洗干净。l 当溶液A和溶液B存在时不能使用金属器具。l 保持容器密封。l 用溶液A和溶液B处理的组织和切片，应该避光。l 除非特别指出， 以下流程需在室温下完成。 快速高尔基染色试剂盒(神经元和胶质细胞) 1. 杀死动物之前对实验动物进行深度麻醉。应尽快地从颅骨中取出动物的脑（或死去病人的脑），但操作时必 须非常小心以免损伤或压迫组织。注意l 除非完全必要，不要对动物进行灌注。如果确实需要对动物进行灌注（用4%的多聚甲醛处理不要超过5分钟）， 一定不要对组织进行后固定处理。l 体积较大的脑部样本包括大鼠脑部应该用锋利的刀片切成大约10mm厚的块状。重要提示！2. 用双蒸水或Milli-Q水快速冲掉组织表面的血液。3. 把组织浸泡在由溶液A和B等体积混合的浸渍液中，室温下黑暗保存两周* 。浸泡6个小时以后或次日更换新 的浸渍液。*对于大多数情况浸泡2周是足够的。然而，不同的组织类型及组织的大小不同可能需要延长或缩短浸泡时间来达 到＊佳效果。对于每种类型的组织的浸泡时间应该通过试验获得，但是对于大多数组织浸泡3周是足够的。注意， 延长浸泡时间可能增加染色背景。注意l 溶液A和溶液B的混合液至少在用之前24小时配制，并不能搅拌。l 采用以上方案则不会产生沉淀是关键的。l 制备好的浸泡液在用之前室温黑暗保存可长达一个月。l 每cm3 待研究组织至少用5ml浸泡液。注意用较少的浸泡液可能降低染色的灵敏性和可靠性。l 为取得＊佳结果，在浸泡期间每周两次对装有组织的容器可轻轻地左右旋涡（一定不要晃动！ ）几秒钟。Warning溶液A和B（含有升汞，重铬酸钾和铬酸钾） 接触皮肤是有毒的，如果吞咽可能是致命的。实验应该在化学通风 橱中完成。当操作这些试剂时应穿戴防护服，手套和防护面具/眼镜。不要把溶液A和B的废弃物倒进水槽中！把溶液A和B的废弃物收集起来放到一个瓶子中，致电安全办公室或有执照的专业废物处理服务的部门处理些材 料。4. 转移组织到溶液C中室温黑暗至少72小时（可长达1周） 。24小时后或次日至少更换一次溶液。5. 在-20℃到-22℃的条件下用冷冻切片机将组织切成100-200um厚的薄片，也可用其它型号的显微镜薄片切片 机包括滑动切片机和振动切片机 。用样本回收器把样本转移到含有溶液C的明胶包被的显微镜载玻片上。载 玻片上多余的溶液用吸管吸走并用滤纸吸干（载玻片上的溶液必须尽可能地吸干否则切片将从载玻片上脱落 下来） 。切片可以室温下自然风干（不能用电风扇或电热板使其干燥） 。为取得＊佳结果，应尽快地完成切 片，制备好的切片如果保存于载玻片盒中，室温黑暗条件下＊长可保存3天。注意l 为避免组织受冷冻切片机的损害，并尽可能地保持细胞形态学，组织在进行冷冻切片之前应快速冰冻。 比如， 组织应按以下描述尽可能地快速冰冻：把组织放在一个塑料匙中慢慢地浸入含有干冰的异戊烷中预冷（为取 得＊佳结果，温度应保持在-70℃以下并且浸入过程用时1分钟，越慢越好） 。组织完全浸入异戊烷之后，使 组织在异戊烷中浸几秒钟，然后再放置干冰上1分钟以确保组织能很好地冰冻。进行切片之前不要让组织融 化。l 切片机的型号可能会有不同，但所用的型号确保能切厚的切片（比如100um）。l 如果冰冻切片机只有一个温度设置，那么在进行切片之前把温度设置在-22℃至少4个小时。如果有两个温度 设置，那么设置槽内温度比样本温度低1℃ 。请注意大多数情况下-22℃是＊佳的温度，然而，为了更顺利地 切出切片并没有破碎，不同型号的切片机和不同的组织可能需要更高或更低的槽内温度。l 对于用冰冻切片机切片， 以下几点提示是有益的： 1 ）用蒸馏水把组织固定于样本盘上，但必须确保组织没 有融化（可以在干冰上完成） 。组织可以被固定在任何类型的组织冰冻介质上包括OCT ，但要避免切断介质。 不要在OCT中包埋组织，如果组织确实需要包埋，用TFM替代OCT 。2） 组织固定到样本盘后，放置组织于 快速高尔基染色试剂盒(神经元和胶质细胞) 干冰上10分钟，然后立即把固定有样本的样本盘安装到冰冻切片机上，等5分钟之后进行切片。3）切好的一 些切片（不要使用防卷板） ，如果组织温度过低比如切片显示出与刀片平行的裂缝，先等几分钟再进行下一 个切片，否则可继续切。l 浸泡的脑组织可用琼脂糖或明胶包埋然后用冰冻切片机切片。然后收集切片时（充满切片槽） ，必须使用溶 液C 。否则切片易干燥裂纹。l 如果用滑动切片机切浸泡的组织，样本盘和刀片都需维持在较低的温度（0℃以下） 按照操作手册的描述切 片固定在含有溶液C的载玻片上是重要的。VI. 染色步骤在染色过程中和盖盖玻片之前的任何一步都不要让切片变干1. 用双蒸水或Milli-Q水冲洗切片两次，每次4分钟。2. 把切片置于由1份溶液D ， 1份溶液E和2份的双蒸水或Milli-Q水组成的混合液中10分钟。 比如：溶液D 10ml 溶液E 10ml 双蒸水 20ml注意l 工作液＊好现配现用，每100ml工作液＊多用于100张切片（比如小鼠脑） ， 根据切片的大小。l 盛有工作液的瓶子或染色罐必须盖好盖子防止试剂蒸发。l 为取得＊佳结果，孵育期间应频繁搅拌工作液。3. 用蒸馏水或Milli-Q水冲洗切片两次，每次4分钟（蒸馏水应频繁更换新的）。4. 用结晶紫或硫堇对切片进行复染（可选步骤）。注意l 对于复染，延长步骤3的时间， 比如用冲洗4次每次5分钟代替原来的冲洗2次每次4分钟，或者更长的时间。5. 在50% ，75%和95%的乙醇中对切片进行脱水，每个浓度梯度脱水4分钟（不要跳过任何一个步骤）。6. 然后在无水乙醇中对切片进行脱水，4次，每次4分钟（不要延长时间）。7. 在二甲苯中透明，3次，每次4分钟，并且用树脂封片剂对盖玻片进行封片。注意l 盖玻片之前切片可以暂时存于二甲苯中几个小时。l 为取得＊佳结果，＊好用未稀释的封片剂。l 用Golgi染色的切片无论何时都应避光保存。 注意事项1. 快速高尔基染色试剂盒（神经元和胶质细胞）仅用于体外研究，不能用于诊断或其它应用。2. 试剂盒所包含有试剂是有毒的，吸入或接触皮肤是有害的，如果吞咽可能是致命的。不要用嘴吸。避免吸入 和接触皮肤和眼睛。如果接触，立即用大量的水冲洗并求助医生。3. 在化学通风橱下完成实验。操作这些试剂时须穿戴合适的防护服，手套和眼睛和面部防护罩，完成实验之后 把手彻底冲洗干净。 保存条件: 室温，有效期 12 个月。 上海yy易游体育生物科技有限公司
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）白细胞介素2（IL-2）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被白细胞介素2（IL-2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120 pg/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 pg/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Human Interleukin 2 (IL-2) ELISA Kit instruction Intended useThis IL-2 ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of IL-2 in the sample, this IL-2 ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus IL-2 concentration. The concentration of IL-2 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,7.5,15,30,60,120 pg/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 1.0 pg/ml6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）γ干扰素（IFN-γ）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被γ干扰素（IFN-γ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素（IFN-γ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、50、100、200、400、800 pg/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 pg/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Human Interferon γ (IFN-γ) ELISA Kit instruction Intended useThis IFN-γ ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of IFN-γ in the sample, this IFN-γ ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus IFN-γ concentration. The concentration of IFN-γ in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,50,100,200,400,800 pg/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 1.0 pg/ml6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
Catalog NoIsotypeReactivityApplicationsGene Name Protein NameImmunogen Specificity FormulationSource PurificationDilution Concentration PurityStorage Stability Synonyms Observed Band Cell PathwayTissue SpecificityDM-Ab-13828IgG Human;Mouse;Rat IHC;IFCD68MacrosialinSynthetic Peptide of CD68The antibody detects endogenous CD68 proteins.PBS, pH 7.4, containing 0.5%BSA, 0.02% sodium azide as Preservative and 50% Glycerol.Monoclonal, MouseThe antibody was affinity-purified from mouse ascites by affinity-chromatography using specific immunogen.WB 500-2000 1:200 IF 1:50-200 1 mg/ml≥90%-20°C/1 yearCD68; Macrosialin; Gp110; CD6837kD[IsoformShort]: Cell membrane; Single-pass type I membrane protein.; [Isoform Long]: Endosome membrane; Single-pass type I membrane protein. Lysosome membrane; Single-pass type I membrane protein.Highly expressed by blood monocytes and tissue macrophages. Also expressed in lymphocytes, fibroblasts and endothelial cells. Expressed in many tumor celllines which could allow them to attach to selectins on vascular endothelium, facilitating their dissemination to secondary sites.
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