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ELISA的不同检测方法

2024-04-10

 ELISA的类型 

根据试剂的来源和样本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法,按照原理及操作,市面的方法有:

 

1.间接法ELISA

是检测抗体的方法,原理为利用酶标记的二抗以检测已与固相结合的受检抗体,显色测定。优势在于待测一抗无需标记快速便捷。直接法ELISA与间接法ELISA相似,区别在于一抗酶标,检测孵育也以抗原为主,但直接法ELISA的灵敏度有限,需权衡使用。

 

 2.夹心法ELISA

又分为双抗原夹心法和双抗体夹心法ELISA,原理相似,用于检测抗体或抗原含量。以双抗体夹心法为例,捕获抗体包被在固相载体上,加入抗原或待测样本结合,后加入的检测抗体结合在抗原上,形成三明治夹心形式。双抗夹心法是市面*常见与方便分析的方法。


3.竞争法ELISA


小分子抗原与半抗原的检测方法常用竞争法ELISA,待检样本中抗原越多,被结合的酶标抗原的量会减少,彼此形成竞争负相关体系,显色物质也就越少,根据显色物质的比例可拟合得到待测抗原含量。

 4.其他方法

a.免疫抑制法测ELISA:固相包被抗原,被检样本对底物显色的抑制程度与样本中所含抗原的量成正比,二者之差为待测抗原含量,原理类似与竞争法ELISA。

b.阻断ELISA:目的检测特异性抗体,也称为竞争ELISA,原理为固相包被抗原,待测样本与一抗酶标竞争孵育,待检样本中抗体越多,显色越浅,反则反之。非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒中涉及该法。

c.此外有用于检测IgM抗体的抗体捕捉ELISA,有固相载体改变的Dot-ELISA(硝酸纤维素膜)和C-ELISA(涤纶布),还有技术分类的TRFIA和多因子检测等。




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