ELISA操作步骤
操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自 封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μ L;
3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不 加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 (HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅 或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去 洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
ELISA操作步骤
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