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为什么ELISA实验会出现不显色的结果

2018-10-08

　　现在做ELISA实验的人是有着很多的人，不过遇到的问题也是有很多，而新手出现的问题就更多了。之前就有一个朋友问题，为什么做ELISA实验会不显色，是什么原因？那今天小编就这个问题给大家分析一下，为什么ELISA实验会出现不显色的结果。


　　1.包被原：包括你的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时；

　　2.封闭：封闭液用的是否适合？你说做了几次都没显色，空白孔也不显吗？如果空白也无颜  色，那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔，也可以满孔封闭

　　3.一抗：检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应

　　4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好检查！

　　5.洗涤：用PBST洗涤，包被和封闭时洗板3次；一抗二抗洗涤5次，每次间隔3分钟。手工和机器洗涤没什么不同，就是省力一些。洗5次不会有负影响，在一抗和二抗洗涤过程中，恰恰需要多洗几次，这样有助于减少非特异性吸附。

　　以上几种就是ELISA实验不显色的原因，希望看完这些介绍，能够帮助朋友们解除疑惑。

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