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ELISA试验中如何防止产生气泡
2018-08-06
一般气泡都是集合在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有用触摸,使孔内反响不均一。
包被时有气泡的话,将导致包被不彻底实践包被量下降--弱阳性乃至假阴性。
关闭时有气泡的话,将导致很多未结合位点的存在,引起非特异性结合--本底增高,假阳性。
加样时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性。
加二抗时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性(竞争法相反----假阳性)。
加显色液时有气泡的话---显色不彻底。
加停止液时有气泡的话,1。不能彻底停止反响 2。影响酶标仪比色,OD值增高
洗刷时有气泡的话,非特异性结合物不能彻底洗去,做无用功。
防止办法:
1。加样时尽量接近孔底(不要触摸孔底),用力均匀,不要过快过猛。
2。关闭时一定要加满孔,
3。洗刷时一定要加满孔(重要),气泡会浮上来zui终驱除。手艺洗板时一定要吸干水分并用力拍干。
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