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　　ELISA试剂盒试验中每一个过程都尤为重要，细节不容忽视，它是试验成功的要害与否；在这里为方便各位了解，更好的完结试验，特对高活络ELISA试剂盒操作过程中的忌讳做出以下剖析，供大家参考：

　　1、汲取液体时速度不宜太快，避免产生气泡，汲取的量不够精确。

　　2、手艺洗板时每次参加洗刷液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗刷液溅入另一酶标孔中，避免穿插污染。甩去洗刷液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

　　3、底物为TMB，避免与皮肤相接触。停止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。

　　4、加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按阐明过程严厉操控操作时刻，避免孵育时刻人为延伸，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗完全。

　　5、作时有必要戴手套，穿作业衣，严厉健全和执行消毒隔离准则。

　　6、剩下样品及抛弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后抛弃。

　　7、同批号试剂组分不得混用。

　　8、洗刷时各孔均需加满液体，避免孔口有游离酶不能洗净。

　　9、每次试验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，仅仅zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

　　10、要确保微量加样器的精确性，能够运用蒸馏水和电子天平进行断定(因为蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水能够看作是lg、200 L的水能够看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行断定。

　　11、在运用微量加样器时，汲取不同瓶子中液体后要更换枪头，即便汲取标准品溶液。

　　12、查验技师应具有从事试验室操作的基本素质和实践经验。能娴熟操作试验仪器、器械，具有必定总结和剖析问题的才干，对试验中呈现的意外状况能及时妥善解决。

　　13、操作前仔细阅读阐明书，严厉依照阐明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不行混用。值得改善的地方，重复试验断定建立后才干改善，比如洗板次数的把握等。

　　14、评价试剂的实用性，试剂的安稳与否，对精确率的凹凸到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品重复对比试验，断定试剂符合要求后方可运用。

　　15、加样要精确、快速。加样不精确，酶生成物的量不能断定，直接影响显色成果。别的，显色的深浅及A值的测定与参加显色剂和停止液的量有关，所以加样应稳重。要求在必定时刻内加样完毕的试验，假如加样缓慢，便呈现差错，而且试剂长时刻露出在外，特别室温过高时，保存期会缩短甚至失效。

　　16、运用校对过的微量移液器，扫除天然差错。移液器精确与否对定量检测尤为重要

　　17、严厉把握显色时刻，显色时刻过短，参加停止液反应停止后，底物结合物的量过少，易呈现假阴性。超过显色要求时刻后显色，应判为假阳性，这可能与试剂本身有关。加显色剂后当即显色，不行报阳性，这可能是本底显色的成果。

　　18、洗刷完全，洗板不完全，酶结合物本底显色会呈现假阳性。别的，洗刷液要新鲜，现用现配，陈腐的洗刷液会呈现本底增高现象，也可能呈现假阳性。

　　19、严控反应时刻，反应时刻过长，酶失活；反应时刻过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛结合，生成物结构松散不结实，简单洗掉，都可能形成假阴性。

　　20、ELISA检测操作过程杂乱，可强各环节的质量操控，才干得到精确可靠的检测成果。