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　　据咱们了解，有些ELISA试剂盒对血清和血浆样本的检测作用不好，表现在光值偏低，如RF因子存在的话，光值偏高。发生上述现象的首要原因是杂蛋白较多，成份杂乱。所以需求特别的试剂才干消除影响。　　一：如厂家没有供给专门用于血清血浆样本的缓冲液，仅仅有一个笼统的或统一的稀释液，那么只要用已知浓度的待测目标蛋白参加所测种属的血清直接加样和用已知浓度的待测目标蛋白参加厂家供给的统一的缓冲液中一起检测，也可得出该试剂盒是否可直接用来检测血清血浆样本。　　二：如厂家没有供给专门用于血清血浆样本的缓冲液，那么只要用已知浓度的待测目标蛋白参加所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测目标蛋白参加PBS缓冲液中一起检测比照，这一点是我公司要点阐明的，即可知道该试剂盒是否能够直接用来测血清血浆样本。　　三：如厂家供给专门用于血清血浆样本的缓冲液，ELISA试剂盒可用已知浓度的待测目标蛋白参加所测种属的血清直接加样和用缓冲液按阐明书分别加样，也可得出结果。

　　一般气泡都是集合在酶标板的孔周围，导致孔中液体不能与孔壁有用触摸，使孔内反响不均一。 　　包被时有气泡的话，将导致包被不彻底实践包被量下降--弱阳性乃至假阴性。 　　关闭时有气泡的话，将导致很多未结合位点的存在，引起非特异性结合--本底增高，假阳性。 　　加样时有气泡的话，抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性。 　　加二抗时有气泡的话，抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性（竞争法相反----假阳性）。 　　加显色液时有气泡的话--－显色不彻底。 　　加停止液时有气泡的话，1。不能彻底停止反响 2。影响酶标仪比色，OD值增高 　　洗刷时有气泡的话，非特异性结合物不能彻底洗去，做无用功。 　　防止办法： 　　1。加样时尽量接近孔底（不要触摸孔底），用力均匀，不要过快过猛。 　　2。关闭时一定要加满孔， 　　3。洗刷时一定要加满孔(重要），气泡会浮上来zui终驱除。手艺洗板时一定要吸干水分并用力拍干。

　　ELISA试剂盒保存在2-8℃，运用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这归于正常现象，水浴加热使结晶彻底溶解后再运用。试验中不必的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。规范品稀释液即可视为阴性对照或许空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。严厉依照阐明书中标明的时刻、加液量及顺序进行温育操作。一切液体组分运用前充沛摇匀。 　　ELISA试剂盒功能： 　　1. 准确性：规范品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。 　　2. 灵敏度：检测浓度小于1.0 IU/L。 　　3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反响。 　　4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。 　　5. 储藏：2-8℃，避光防潮保存。

　　一：查验技师应具有从事实验室操作的基本素质和实践经验。能娴熟操作实验仪器、器械，具有必定总结和剖析问题的才干，对ELISA试剂盒实验中呈现的意外情况能及时妥善解决。 　　二：运用校对过的微量移液器，排除天然差错。移液器精确与否对定量检测尤为重要。 　　三：仔细阅读说明书严厉按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不行混用。值得改善的当地，重复实验断定建立后才干改善。 　　四：洗刷完全：洗板不完全，酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗刷液要新鲜，现用现配，陈旧的洗刷液会呈现本底增高现象，也可能呈现假阳性。 　　五：严控反响时刻：反响时刻过长，酶失活；反响时刻过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛结合，生成物结构松懈不结实，简单洗掉，都可能形成假阴性。 　　六：留意ELISA试剂盒保存期，过保存期的试剂不能运用。 　　七：评价试剂的实用性：试剂的安稳与否，对精确率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品重复对比实验。显色时刻过短，参加停止液反响停止后，底物结合物的量过少，易ELISA试剂盒呈现假阴性。超越显色要求时刻后显色，应判为假阳性，这可能与试剂自身有关。加显色剂后当即显色，不行报阳性，这可能是本底显色的成果。 　　八：加样要精确、快速 　　假如加样不精确，酶生成物的量不能断定，直接影响显色成果。显色的深浅及A值的测定与参加显色剂和停止液的量有关，所以加样应慎重。要求在必定时刻内加样完毕的实验，假如加样迟缓，便呈现差错，而且ELISA试剂盒试剂长时刻暴露在外，特别室温过高时，保存期会缩短乃至失效。

　　科研试剂的保存存在一定的特殊性，许多客户将Elisa试剂盒冷冻保存后担心会有影响。建议yy易游体育 将试剂盒冻结后一次用完。yy易游体育 知道，一般来的试剂盒保质期在半年到一年，切不可重复冻融。Elisa试剂盒冷冻后直接运用有影响，对一些弱阳性标本的检测呈现假阴性。 　　正确的操作方法是：先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在ELISA检测试剂盒运用前与室温平衡。这样做的意图，首要是为了在后面的温育反响过程中，能使反响微孔内的温度能较快地到达所要求的高度，以满意测定要求。